概述
肿瘤组织多重荧光标记与高内涵分析，研究细胞间相互作用。
背景与研究场景
Hölzel实验室的Sonia Leonardelli博士对一系列不同的肿瘤组织样本进行荧光成像，其中一个主要项目是研究腺癌中的细胞-细胞相互作用。
本实验室使用蔡司显微镜使用Akoya Biosciences ®的CODEX ®系统进行荧光成像，以拍摄具有多个不同荧光团的多幅荧光图像，然后可以整理并输出同一图像中的所有荧光团，最多60种不同类型。来自这些实验的图像通常具有多达8种不同的荧光标记，并且是密集、高含量的图像，揭示了有关肿瘤微环境的细节。
使用这些多重荧光方法对肿瘤样本进行成像，使Leonardelli博士能够了解正在发生的相互作用，组织对药物的反应以及肿瘤恶性肿瘤的发展情况。这将进一步允许开发生物标志物，以观察肿瘤如何发展以及它们对不同疗法的反应。
技术挑战
Codex ®系统具有10倍或20倍的物镜，这意味着虽然可以在大视场范围内采集图像，但由于较低的物镜数值孔径，它们的分辨率受到限制。将需要具有较小像素的高分辨率相机来获取细胞水平的细节，以便观察细胞与细胞的相互作用。
由于使用的荧光团范围广泛（包括DAPI、Cy3、Cy5和Cy7 ） ，因此与该系统一起使用的任何检测器都需要在从蓝色到近红外线的广泛波长范围内具有高量子效率，以便使用没有光谱重叠的大多数荧光团。高灵敏度相机还可以降低照明强度以避免漂白。
成像方案与成果
Prime BSI是这种多重荧光成像的绝佳解决方案，因为它提供高灵敏度和高分辨率。Leonardelli博士说，由于Prime BSI的高分辨率，她能够在可用的多个荧光团中看到细胞与细胞的相互作用。Prime BSI具有95 ％的峰值量子效率，并且在从紫外线到近红外线的广泛波长范围内具有高灵敏度，以便在这些多重实验中从各种荧光团获取数据。
此外，通过CODEX ®软件优化， Leonardelli博士还将能够降低光照强度，并利用Prime BSI的高灵敏度。
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